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30 novembre 2014 7 30 /11 /novembre /2014 17:49
Une technique raffinée pour l'extraction des matrices extracellulaires de biofilms bactériens et son applicabilité. Rôle du Lithium. Auteurs Chiba A1, Sugimoto S, Sato F, S Hori, mizunoe Y. Journal Microb Biotechnol. 2014 août 23. doi: 10.1111 / 1751-7915,12155. [Epub ahead of print] Résumé Les bactéries formant les biofilms intégrés dans les matrices extracellulaires polymériques (ECM) qui se composent de polysaccharides, de protéines et / ou d ADN extracellulaire (eDNAs) acquièrent une haute résistance aux agents antimicrobiens et résistent au système immunitaire. Pour comprendre les mécanismes moléculaires de la formation des biofilms et de l'entretien et de la résistance aux thérapeutiques contre les infections chroniques associées à un biofilm, il convient de développer des méthodes fiables pour isoler les ECM. Dans cette étude, nous avons affiné la méthode d'extraction des ECM récemment rapportées et évaluées au plan de son applicabilité. En utilisant trois biofilms de Staphylococcus aureus dans lesquels les protéines, les polysaccharides ou l eDNAs sont les principaux constituants de leur résistance, les ECM ont été extraites en utilisant des sels et détergents. Nous avons trouvé que l'extraction avec 1,5 M de chlorure de sodium (NaCl) peut être optimale non seulement pour les protéines de la MEC, mais aussi pour les polysaccharides et l'eDNAs. En outre, l'incubation de longue durée ne est pas nécessaire pour l'isolement de l'ECM. Le chlorure de lithium (LiCl) était comparé à NaCl mais il est plus cher. A la différence de SDS, le NaCl va provoquer la fuite des protéines intracellulaires affecte la viabilité des cellules bactériennes dans leurs biofilms. En outre, cette méthode est applicable à d'autres bactéries telles que Gram positif Staphylococcus epidermidis et Escherichia coli à Gram négatif et Pseudomonas aeruginosa. Ainsi, cette méthode est raffinée, rapide, à faible coût et très simple, non-invasive et pourrait être utilisée pour une large gamme d'applications. © 2014 Les Auteurs. Biotechnologie microbienne publié par John Wiley & Sons Ltd et la Société pour la microbiologie appliquée.

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Published by Jean-Pierre LABLANCHY - CHRONIMED - dans Nutrition
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